معصومه آقاجانی در سال ۱۳۳۸ در ارومیه متولد شد. در سن ۱۶ سالگی با بازی در تئاتر بامها و زیر بامها فعالیت هنری خود را آغاز کرد و پس از فارغ التحصیلی از دانشسرای هنر به یادگیری هنرهای مختلفی همچون موسیقی، مجسمه سازی، تئاتر و نقاشی پرداخت.
او با بازی در فیلم «جاده عشق» فعالیت در عرصه سینما را آغاز کرد.